rLys-C蛋⽩酶，质谱级
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HLS LYS001C rLys-C 蛋⽩酶 20μg
HLS Hac001 50mM醋酸溶液 400μl
说明：质谱级rLys-C蛋⽩酶特异性⽔解在赖氨酸⽚段的C端的肽键。可⽤于提⾼对不易⽔解的蛋⽩质的消化;推荐在6-8M尿素溶液中进⾏
物理形态：质谱级rLys-C蛋⽩酶是冻⼲粉，含0.5mg海藻糖/瓶
分⼦量：27kDa
溶解液(HLS HAc001C)：rLvs-C蛋⽩酶复溶解缓冲液建议1mM盐酸或50mM醋酸
储存条件：冻⼲粉末存储在-20°C冰箱，再溶解的酶储存在-20°C。有效期见产品标签
保质期：24⽉在-20°C
pH 值范围：在 8-9 时,rLys-C具有最佳活性
适⽤范围：rLys-C蛋⽩酶特异性⽔解变性后⽐较不易酶切的蛋⽩质K位，推荐和Trypsin混合使⽤
混合酶推荐S O P：
A.通⽤溶液酶解法：
100ug Trypsin/20ug rLys-C混合酶按照 25:1蛋⽩和蛋⽩酶的量(w/w)使⽤,37°C恒温过夜13-16⼩时
温馨提⽰：尿素的浓度最好⼩于1M,50mM Tris-HCI缓冲溶液(pH 8)
B.1+1步溶液酶解法：
1.100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照 25:1 蛋⽩和蛋⽩酶的量(w/w)使⽤,37°C.恒温酶解2-4⼩时
温馨提⽰：尿素的浓度为6-8M,50mM Tris-HCI 缓冲溶液(pH 8)
2.稀释上⼀步的溶液6倍，37°C恒温过夜13-16⼩时
温馨提⽰：尿素的浓度最好⼩于1M,50mM Tris-HCI缓冲溶液(pH 8)
质量控制 ｜Quality Control
纯度：液相⾊谱280nm检测杂质蛋⽩质峰强度，rLys-C峰强度⼤于99.9%
专⼀性：E.coli⼤肠杆菌样品，ESI-MS/MS质谱分析K端的专⼀性⼤于99.5%
活性：25unitmin/mg:单位定义:rLy-C⽩蛋酶每分钟酶切1.0 umole T-G-P Lys Nitroanilide的量，反应条件:25°℃，波长405nm
Maldi TOF质谱检测：纯化后的蛋⽩酶使⽤HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋⽩质峰
LC-MS/MS 质谱分析：使⽤rLys-c酶解HSA(⼈⾎清⽩蛋⽩，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护,PH8.0,37°C恒温过夜16⼩时,液质QE
联⽤仪 分析，覆盖率87%。
